将细胞冻存管由液态氮中取出，置于室温回温，不用水浴溶解。此时可准备新鲜培养 基、无菌15ml离心管、培养瓶。在生物安全柜内，直接以少量培养基反复冲融，使细胞团块化冻。 先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基，再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g，3分钟离心收集细胞。 倒去上清液，重悬细胞，移到培养瓶中培养。
细胞为何总是喜欢抱团？1，细胞死释放出dna，缠绕其他细胞，三明双抗，形成黏性的细胞团（---的过程可能过于粗暴，吹打太用力，---太久，---液太强或有毒性等）。2，细胞离心速度过大或时间太长。3，双抗批发，---不完全的时候，细胞和细胞之间的连接没有分开；---过度的时候，圆形的细胞容易聚堆，再分开很困难！4，状态不好、老化的细胞，双抗出售，也可能会出现抱团生长的情况（比如换液不及时、长的太满才传代、污染等造成的细胞状态）。5，传代后细胞铺板不均匀。
多肽的稳定性研究，引起多肽不稳定的原因：（1）水解：多肽中的肽键易水解断裂。由asp参与形成的肽键比其它肽键更易断裂，尤其是asp-pro和asp-gly 肽键。（2）形成错误的二硫键：二硫键之间或二硫键与巯基之间发生交换可形成错误的二硫键，双抗公司，导致三级结构改变和活性丧失。（3）消旋： 除gly外，所有---酸残基的α碳原子都是手性的，易在碱催化下发生消旋反应。其中asp残基易发生消旋反应。
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