若您养的是贴壁细胞，请先将细胞---下来；若是悬浮细胞，快速转膜液电话，请直接按以下步骤进行：1. 以200-300g离心3分钟，收集细胞。2. 用bi冻存液将细胞重悬（不需回温），将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml，快速转膜液批发，添加到冻存管中（一般每管1ml）。3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中，置于-80°c冰箱6小时以上或是过夜（或不需要程序降温)。4. 将冻存管迅速移到液态氮中保存。5. 冻存24小时后，建议检测细胞存活率。
你的细胞又不舒服了，我们建议除了考虑---污染的问题，也不要忽视细胞老化。细胞老化有哪些表现？1.细胞老化开始的现象通常为细胞内部会出现空泡（可能是凋亡小体），也可能会出现黑点，大多沿细胞周边排布，内部中间也可能会显现一些，但相对周边为少。2.老化以后的细胞会出现立体感慢慢消失，三明快速转膜液，开始成扁平状，快速转膜液，细胞与细胞之间的间隔减小或混在一起，细胞不再是梭形，而会成为各种不规则形状。
如何预防细胞老化？1. 防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种，---是传代，不能等细胞太密了之后传，一般细胞建议长到70％融合度传代好。2. 换培养液应该根据自己细胞消耗培养基的情况来确定是否该换。如果感觉时间不好把握的话就多培养几瓶细胞，在不同的时间换液，后再来比较下，看什么时候换液好，得出自己的结论。
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