dulbecco’s modified eagle medium(dmem)是目前常使用的改良式eagles培养基。dmem与mem含有相同的营养成分,胎牛血清,但浓度高出2~4倍。主要用于快速生长的细胞,分低糖(1000mg/l)、高糖(4500mg/l)两种。dmem含更高浓度的nahco3,要用10%的co?来平衡,当然也可以在较低co?浓度下使用。dmem-高糖(标准型)更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,胎牛血清用途,但又不希望它脱离原来生长点的培养,也可用于杂交瘤中瘤细胞和dna转染的转化细胞的培养。
在生物反应器中生产需要对悬浮的生产细胞扩大培养。多个用于生产慢---的细胞系(293t、293ft、293sf-3f6)被---易于在化学成分限定的培养基(freess 293&f17, invitrogen, carlsbad, ca; hyqsfm4transfx293, hyclone, logan, ut)中适应悬浮培养。这些细胞可以在没有为载体的情况下迅速悬浮生长,胎牛血清使用方法,这使得它们的培养和扩---贴壁培养的细胞容易很多。此外,培养基中没有其他动物来源的组分是---生产合适的情况,它可以降低被外源物质污染的风险。
提高多肽稳定性的途径:(1)---突变 :通过基因工程手段替换引起多肽不稳定的残基或引入能增加多肽稳定性的残基,可提高多肽的稳定性。(2)化学修饰:多肽的化学修饰方法很多,研究多的是peg修饰。peg是一种水溶性高分子化合物,胎牛血清多少钱,在体内可降解,---。peg与多肽结合后能提高热稳定性,抵抗蛋白酶的降解,降低抗原性,延长体内半衰期。选择合适的修饰方法和控制修饰程度可体质或提高原生物活性。
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